现代细胞和分子生物学的发展越来越依赖于高度纯化、功能完好无损的细胞、亚细胞器和生物大分子的大量富集。生物颗粒在科研和临床的应用为分离技术的进步提供了源动力。
分离生物颗粒混合液最常用的方法是密度梯度离心,形成密度梯度介质的选择对于生物颗粒功能的保持非常关键
60年代初期,Nycomed已经研发生产出碘化物作为***显影剂。并很早就认识到这些化合物也易形成密度梯度,这就为改进生物颗粒,尤其是渗透敏感的细胞和亚细胞器的分离方法提供了新的契机。因此在过去30年内,Nycomed积极进行密度梯度介质的研发和生产。
2000年2月,挪威Axis-shield公司接手了这些产品,掀开了Nycomed密度梯度分离液发展新的历史篇章。Axis-Shield是一家生物制药公司,公司在密度梯度介质的生产和销售方面拥有超过35年的经验。
今天,挪威Axis-Shield公司的密度梯度分离液用途广泛,不仅可以分离各种细胞和亚细胞器,而且可以分离各种生物大分子(如脂蛋白、核酸等)和各种病毒。Axis-Shield公司的分离液产品符合欧洲cGMP标准(相等于美国FDA标准),具有安全***,低等渗透性和分离纯化效果好等优点,广泛应用于各相关科研和临床领域。
1) Lymphoprep分离液
Lymphoprep是一种无菌、内毒素含量低的即用型分离液,是目前国内外分离正常人或病人外周血单个核细胞(PBMC:Mononuclear cells of Peripheral blood)(包括单核细胞monocytes和淋巴细胞lymphocytes)的常用方法,具有与昂贵的GE公司的PLUS或PREMIUM分离液同样的指标。
Lymphoprep 分离液(即用型)--芃硕生物 咨询热线: 400-801-9278
工作原理:
PBMC与血液中的其他成分存在密度梯度,利用密度在1.077±0.001g/ml之间而且近于等渗的Lymphoprep溶液作密度梯度离心时,红细胞和粒细胞由于密度大,故沉于分层液底部。PBMC密度稍低于分层液,故位于分层液界面上,获得PBMC。
Axis-shield公司的Lymphoprep溶液含有多糖(polysacccharide),多糖能粘附在细胞表面,使红细胞和粒细胞聚集下沉,但它对淋巴细胞的活性和红细胞、粒细胞进一步分离有***影响。
技术参数:
泛影葡胺钠(Sodium diatrizoate):9.1% (w/v);
多糖:5.7% (w/v);
密度:1.077±0.001g/ml;
渗透性:280±15mOsm;
内毒素含量:<1.0EU/ml
2)Lymphoprep分离管
Lymphoprep分离管是配合Lymphoprep分离液用来分离人外周血单个核细胞(PBMC)的。该试管是无菌的,试管内壁中部有一个塑料过滤圈,Lymphoprep分离液在过滤圈的下面。这种结构能防止血液和分离液搅在一起,而且红细胞和粒细胞能透过过滤圈沉到管底,取而代之,分离液位于过滤圈的上面。这样,有助于增强分离纯化的效果。
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3)Nycoprep 1.077分离液(即用型)
工作原理:
Nycoprep 1.077 分离液主要是分离人外周血单个核细胞(PBMC), 它和Lymphoprep 分离液的工作原理是相同的,密度也相同(1.077g/ml)。不同之处在于Nycoprep 1.077分离液中非离子化的Nycodenz?代替泛影葡胺钠(Sodium diatrizoate)溶液。而且它不含有Ficoll和多糖(polysacccharide),因此避免了Lymphoprep分离液的缺点,具有更好的分离效果。
技术参数
Nycodenz:14.1% (w/v) ;
Nacl:0.44% (w/v);
Tricine/NaoH, PH7.0:5Mm
密度:1.077±0.001g/ml;
渗透性:295±15mOsm;
内毒素含量:<1.0EU/ml
主要分离人外周血单个核细胞(PBMC)。
4)Polymorphprep分离液(即用型)
工作原理:
Polymorphprep分离液高等渗透性可引起红细胞失水和收缩,增加了红细胞的浮力密度,从而使红细胞随着Polymorphprep分离液(ρ=1.113g/ml)中的右旋糖苷溶液下沉。从而解决了红细胞浮力密度(ρ=1.09-1.11g/ml)和粒细胞密度十分相近而难分离的问题,使粒细胞和单核细胞在泛影葡胺钠界面分离开。该产品可以同时分出多形核细胞和PBMC细胞,是目前 的可以在一次实验中分出此两种细胞的分离液。
描述:
主要用于分离多型核细胞(PMN, 即粒细胞)的分离。
技术参数:
泛影葡胺钠:13.8% (w/v);
右旋糖苷500: 8.0% (w/v);
密度:1.113±0.001g/ml;
渗透性:460±15mOsm;
内毒素含量:<1.0EU/ml
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5)Optiprep分离液(即用型)
工作原理:
Optiprep分离液是Axis-shield公司开发出的全能新型分离液,Optiprep分离液的主要成是odixanol,是一种高亲水性非离子的物质,这种主要成分决定了Optiprep分离液是一种高密度、低粘度的溶液。而且,它的密度和渗透性成线形关系,在加入适当浓度的缓冲液或基本培养基,如蔗糖、Hepes或PRMI后,Optiprep能形成连续的或不连续的等渗的密度梯度溶液,可将各种细胞、细胞器、脂蛋白分离开。经科研和临床***,Optiprep和常规的分离液Ficoll、Percoll、蔗糖及氯化铯(CsCl)相比,Optiprep分离液不仅分离纯化效果好,而且对各种细胞、细胞器的生命活性无任何影响。
描述:
研制出的全能型分离液,主要成分为odixanol。可以用于分离细胞、亚细胞结构和大分子物质。
技术参数:
lodixanol: 60%(w/v);
密度:1.320±0.001g/ml;
渗透压:170±15mOsm;
内毒素含量:<1.0EU/ml
6)Nycodenz 粉剂
Nycodenz(Iohexo1的商品名)是一种白色、高亲水性的粉剂,可以配成全能型非离子梯度分离液,具有对细胞极低毒性,耐高温性,可配成高密度分离液的特点。
技术参数:
Nycodenz 粉剂可溶于水溶液中(浓度:80%w/v;密度:1.426g/ml)。
产品编号 | 产品名称 | 规格 |
AS1002424 | Nycodenz 粉剂 | 1x500 g |
AS1019817 | Lymphoprep Tube | 30 Tubes x2 ml |
AS1019818 | Lymphoprep 分离管(即用型) | 18 Tubes x10 ml |
AS1114542 | OptiPrep 分离液 | 1x250 ml |
AS1114544 | Lymphoprep 分离液(即用型) | 1x250 ml |
AS1114545 | Lymphoprep 分离液(即用型) | 4x250 ml |
AS1114546 | Lymphoprep 分离液(即用型) | 1x500 ml |
AS1114547 | Lymphoprep 分离液(即用型) | 6x500 ml |
AS1114550 | NycoPrep 1.077 分离液(即用型) | 4x250 ml |
AS1114551 | NycoPrep 1.077 分离液(即用型) | 1x250 ml |
AS1114683 | polymorphprep | 1x250 ml |
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